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外泌體作為疾病診斷的標志物具有其獨特優(yōu)勢:(1)與正常細胞相比，病變細胞產(chǎn)生的外泌體在分泌量和內容物方面存在明顯差異。病變的細胞和組織能夠產(chǎn)生更多外泌體。(2)由于特殊的生成方式，外泌體的組成不同于來(lái)源細胞。其內包含的一些特異性蛋白質(zhì)能夠揭示外泌體的起源、結構和運輸方式，有利于深入了解外泌體的產(chǎn)生機制。(3)病變細胞分泌的外泌體通過(guò)胞吐的過(guò)程進(jìn)入血液、尿液等體液，囊泡狀結構能夠保護外泌體內部生物分子不受體液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干擾，有利于保持其結構完整和生物活性，通過(guò)對此類(lèi)體液進(jìn)行分析可以實(shí)現疾病的無(wú)創(chuàng )或微創(chuàng )檢測。與正常細胞來(lái)源外泌體在結構分子上的差異倍受矚目。血細胞提取試劑盒公司

外泌體普遍參與細胞間物質(zhì)運輸與信息傳遞，調控細胞生理活動(dòng)。同時(shí)，外泌體具有抗原提呈、免疫逃逸、誘導正常細胞轉化、促進(jìn)種瘤發(fā)生和轉移等作用；此外，外泌體還可以作為“天然的納米粒子”來(lái)進(jìn)行藥物遞送。外泌體相關(guān)數據庫有哪些？lexoRBase數據庫收集和描述人類(lèi)血液外泌體中所有長(cháng)的RNA，包括circRNA、lncRNA和mRNA。lEVpedia和Vesiclepedia數據庫匯總了不同囊泡研究中發(fā)現的蛋白、mRNA、miRNA、脂類(lèi)等信息。lExoCarta數據庫主要收錄了包括人、大鼠、小鼠、綿羊等幾個(gè)物種的286個(gè)研究結果，涉及蛋白、mRNA、miRNA、脂類(lèi)等信息。外泌體是各種細胞外泌的直徑在30-100nm之間的膜囊泡。杭州外泌體PKH67外泌體具有良好的生物兼容性、穩定性和內在靶向性，使其在藥物遞送方向大有潛力。

密度梯度離心是基于差速超高速離心的改良技術(shù)。該方法需預先利用常用的梯度液介質(zhì)如蔗糖、碘克沙醇和氯化銫等，在離心管中構筑從底部到頂部密度逐漸降低的密度梯度帶。根據密度梯度構建和沉降方式的不同,又可以分為速率區帶離心法和等密度梯度離心法,前者主要根據顆粒的沉降速率分離,介質(zhì)密度均小于外泌體密度,離心時(shí)樣品在向超速離心管底部移動(dòng)時(shí),會(huì )通過(guò)密度不斷增加的密度梯度區帶,密度大的顆粒更容易穿過(guò)密度更高的梯度層,更快地到達管底,因此控制離心的時(shí)間很重要;等密度梯度離心法中的密度梯度區帶,則會(huì )根據樣品液中各種溶質(zhì)成分來(lái)進(jìn)行組合,離心過(guò)程中,無(wú)論離心時(shí)間多久,不同密度顆粒jin會(huì )富集到具有相同密度的梯度區帶,而不會(huì )沉淀到底部。

為獲得外泌體的大小、濃度、形態(tài)及蛋白質(zhì)組成等信息，可以通過(guò)電鏡、動(dòng)態(tài)光散射、納米顆粒跟蹤分析儀、蛋白質(zhì)免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附法、流式細胞儀等對外泌體進(jìn)行表征。通過(guò)電鏡可獲得外泌體的形態(tài)信息，不同類(lèi)型的顯微鏡由于操作環(huán)境不同，得到的外泌體形態(tài)存在差異。例如，在掃描電鏡、透射電鏡和原子力顯微鏡中，外泌體呈現囊泡獨有的茶托形，可能由于樣品在固定或染色過(guò)程中極度脫水，導致外泌體塌陷所致。與之相反，在冷凍電鏡中外泌體呈現圓形，由于不會(huì )脫水變性，所得的外泌體形態(tài)可能更加接近囊泡的真實(shí)狀態(tài)。另外，由于透射電鏡和原子力顯微鏡具有較高分辨率，也能夠提供外泌體磷脂雙分子層厚度、粒徑分布等信息。從外泌體中篩選的生物標志物，可用于疾病的診斷、預后及治理。

外泌體運輸的基因類(lèi)藥物也可以是miRNA，miRNA是一類(lèi)非編碼的內源性RNA，主要用于調節轉錄后的基因表達。miRNA主要通過(guò)與mRNA的未翻譯的區域(UTRs)結合起到抑制基因表達和降解mRNA的作用。與siRNA不同，miRNA抑制mRNA的表達不需要完美的堿基配對，因此每種miRNA可以抑制多種蛋白質(zhì)的表達，而每種siRNA只針對一種蛋白質(zhì)。miRNA的運載也存在著(zhù)種種挑戰:miRNA體內穩定性差、生物分布不理想、易被體內酶降解以及容易引起副反應等。越來(lái)越多的研究表明外泌體也是體內運載miRNA的優(yōu)良載體，并且利用外泌體運輸miRNA的zhiliao方法已經(jīng)在許多疾病模型中得以應用。干細胞外泌體有減少細胞凋亡、促進(jìn)血管生成、抑制纖維化等重要生物學(xué)功能，在調控組織再生方面有好的前景。安徽外泌體PKH26

外泌體的遺傳分子與肝臟病理息息相關(guān)，在肝臟疾病診斷中可作為潛在的治理靶點(diǎn)或分子標志物。血細胞提取試劑盒公司

外泌體在神經(jīng)系統中與神經(jīng)回路的控制相關(guān)，同時(shí)各種神經(jīng)退行性疾病的致病蛋白還可以通過(guò)外泌體釋放到細胞外并傳遞到其他細胞，與病情發(fā)展密切相關(guān)。病細胞釋放的外泌體含有許多與血管新生和免疫逃逸相關(guān)的分子，構建適合病細胞生長(cháng)的微環(huán)境，促進(jìn)病細胞的發(fā)展。另外，病細胞來(lái)源的外泌體上粘著(zhù)分子的表達形式?jīng)Q定著(zhù)癥狀向身體部位的轉移途徑。近，有報告指出脂肪細胞釋放的外泌體對肝臟的遺傳基因表達有控制作用。許多病毒利用外泌體的產(chǎn)生路徑傳播細胞，受病毒傳播的細菌和寄生蟲(chóng)通過(guò)外泌體控制其他受細胞傳播的細菌、寄生蟲(chóng)的活動(dòng)。血細胞提取試劑盒公司

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